細(xì)胞名稱

小鼠成纖維細(xì)胞PA317

英文名稱

PA317

形態(tài)特性

成纖維細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性

貼壁生長(zhǎng)

種屬

小鼠

組織

胚胎

培養(yǎng)體系

DMEM＋10% FBS＋1% P/S     氣相：空氣，95%；CO2，5%。  溫度：37℃

簡(jiǎn)介

PA317細(xì)胞源自TK-NIH/3T3細(xì)胞，通過pBR322中的包裝結(jié)構(gòu)DNA(pPAM3)和pBR322中的單純皰疹病毒胸苷激酶基因共同轉(zhuǎn)染構(gòu)建而成。通過感染或轉(zhuǎn)染將逆轉(zhuǎn)錄病毒載體導(dǎo)入這些細(xì)胞，結(jié)果生成可以感染許多哺乳動(dòng)物細(xì)胞的雙嗜性載體顆粒。PA317細(xì)胞生成的病毒顆粒已成功地用于將基因?qū)肴祟悾赡芤驗(yàn)橛糜跇?gòu)建PA317細(xì)胞而轉(zhuǎn)入的DNA丟失，能夠包裝逆轉(zhuǎn)錄病毒載體的PA317細(xì)胞百分比隨傳代而減少。在含0.03mM次黃嘌呤、0.001mM氨甲喋呤和0.02mM胸苷的培養(yǎng)基中短暫(大約5天)選擇，可以選出保留了包裝功能的細(xì)胞。選擇后，PA317細(xì)胞應(yīng)在HT培養(yǎng)基(0.03mM次黃嘌呤、0.02mM胸苷)中培養(yǎng)4天，以稀釋殘留的氨甲喋呤，此后PA317細(xì)胞不需選擇可以穩(wěn)定至少1個(gè)月。 

傳代方法

建議第一次1:2傳代

凍存條件

90 FBS+10% DMSO,  推薦無血清凍存液 (CX001)

用途

僅限于科學(xué)研究，不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。